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紫外可見分光光度法合適的檢測波長范圍是200~800nm。
紫外可見光分光光度計(jì)工作原理與紅外光譜、拉曼光譜的工作原理近似,采用一定頻率的紫外可見光照射所需檢測的物質(zhì),引起物質(zhì)中電子躍遷,從而表現(xiàn)出隨著吸收波長變化而引起的光譜變化,記錄光譜變化形成分析數(shù)據(jù)。
紫外可見光分光光度計(jì)使用的波長范圍為紫外光區(qū)200-400nm和可見光區(qū)400-850nm。儀器主要結(jié)構(gòu)包括:輻射源(光源)、色散系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、吸收池、數(shù)據(jù)處理器、自動(dòng)記錄器、顯示器等部件。
由光源發(fā)出連續(xù)輻射光,經(jīng)單色器形成單色光。單射光照射吸收池,再經(jīng)光經(jīng)檢測器光電管將光強(qiáng)度轉(zhuǎn)變成電信號,再經(jīng)顯示系統(tǒng),完成測定。
擴(kuò)展資料
紫外分光光度計(jì)按照光源種類劃分為:傳統(tǒng)單光束UV紫外測試,測試過程全程封閉,單光束光源只通過光柵直接照射樣品,再經(jīng)光電倍增管檢測器檢測。測試空白樣品之后才能測試目標(biāo)樣品,全波段需要時(shí)間最長為2min;
比例雙光束UV,測試過程全封閉,單光束光源通過光柵,再經(jīng)棱鏡,分成2束UV,分別照射目標(biāo)樣品與空白樣品,再合并光進(jìn)入光電倍增管檢測器檢測,經(jīng)差減法得到結(jié)果。目標(biāo)樣品與空白樣品可以同時(shí)測量,測試靈敏度降低,全波段分析時(shí)間長。
雙光束UV:與比例雙光束UV不同之處是通過棱鏡分出兩道光后,在分別通過光柵,各自分別進(jìn)入光點(diǎn)倍增管檢測器檢測。加強(qiáng)了靈敏度,同時(shí)保留同時(shí)測量空白樣品與目標(biāo)樣品的優(yōu)點(diǎn),全波段分析時(shí)間長。
全波段UV:樣品與空白樣品可以暴露在空氣中,照射樣品后,進(jìn)入密閉箱,通過光柵,進(jìn)入DAD檢測器檢測。檢測樣品不需要密閉,外界光線對測試無影響,使用方便準(zhǔn)確且空白只需要檢測一次,全波段分析時(shí)間小于1s。